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乳制品激素检测技术分析

发布时间:2019-04-29 09:35:20 浏览量:84

随着人们生活水平的提高,市场对乳制品的需求与日俱增,乳制品激素问题也随之出现。
由于激素能够促进奶牛的生长、泌乳增加产奶量,导致一些奶农向饲料中添加激素或直接给奶牛注射激素。随着激素合成技术的提高,应用于畜禽产品的激素种类和数量逐渐增加。激素会通过泌乳进入牛奶中。被人体摄入后,会明显影响人体的激素平衡,引起致癌、致畸,如已烯雌酚可能引起女童早熟、子宫癌及男性的女性化等。开发准确、快速的检测方法来解决我国乳制品行业面临的难题已成为当务之急。

乳制品激素检测技术分析-目前,国际上针对乳制品激素检测的技术主要包括仪器分析、酶联免疫技术和生物芯片技术。
一、仪器分析法
仪器分析法主要有气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)和液相色谱-质谱法(LC-MS)。这些检测方法均存在一定的弊端:激素是高沸点、低挥发性物质,气相色谱法不适合对激素进行直接测定,一般需要对目标激素进行衍生化处理,因此样品处理复杂、费时;HPLC灵敏度低,很难达到食品基质中的外源性激素检测要求;气质联用分析法在性激素检测中的不足之处在于需要繁琐的衍生化过程;液质联用技术将液相色谱的强分离能力与质谱检测器的丰富结构信息、高灵敏度特点结合,具有灵敏度高、且能提供化合物的结构特征等特点,是定性定量非常可靠的确认方法,但仪器成本较高,操作较复杂,同时对操作人员的要求较高。
二、酶联免疫技术
酶联免疫技术是以抗原抗体的特异性结合及酶与底物的显色反应为基础的检测方法。
酶联免疫技术的基本原理:
1、使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
2、使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
酶联免疫法的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。
乳制品激素检测技术分析
三、生物芯片技术
生物芯片是根据生物分子间特异相互作用的原理,将生化分析过程集成于芯片表面,从而实现对DNA、RNA、多肽、蛋白质以及其他生物成分的高通量快速检测技术。英国朗道公司的Evidence Investigator多分析物生物芯片检测系统可用于检测乳品、蜂蜜、尿液、组织等多种样品中的激素残留和兽药残留,是世界上第1台多分析物、半定量药物残留分析仪。
生物芯片技术基于ELISA(酶联免疫反应)原理,采用夹心和竞争的免疫检测方法,每个载体含9个生物芯片(以3x3形式排列),相当于9个反应器,在生物芯片的预定独立检测区域上(每个芯片25个检测区域)固定了多种特异捕获配合基(抗体或者抗原)。当样品中含有待测物时,待测物可与芯片上固定的抗体或抗原及辣根过氧化物酶标记的抗原结合,加入信号试剂后,产生光信号,随后超低温CCD相机(高分辨的CCD成像技术)获取生物芯片每个测试区产生的光信号,并由独一无二的图像处理软件将光信号迅速转换为分析物的浓度,无须手工计算。
Evidence Investigator生物芯片检测系统可同时对单个样本进行多个分析物的定量检测(每次最多可检测23个项目),测试速度比传统实验室分析仪更快速更有效。
仪器采用高通量设计,可在2小时内检测45个样品或675个检测项目,大大节省人力物力(至少可节省5倍人力),节约时间,节约检测费用。
样品经处理后可应用于多种检测组合,无须重复处理样品。
无须标准品,易于操作,无须专业技术人员。
试剂盒提供整套试剂,无隐形或额外成本,只需25ul微量样本可同时得到多种分析物的检测结果,一次最多可检测54个样本。
现有的可用于检测乳制品中激素残留的生物芯片包括多基质生长激素组合(检测项目包括β-兴奋剂、勃地酮、皮质类固醇、去甲睾酮、莱克多巴胺、司坦唑、二苯乙烯、群伯龙和玉米赤霉醇)和合成甾醇类组合(检测项目包括17β-氯睾酮、乙炔雌二醇、促孕激素类和甲基睾酮)。
我国乳制品激素检测应提高检测方法的灵敏度及定性能力,实现多种激素残留的同时快速测定,在更多地应用和发展色谱法和色谱-质谱联用法的同时,也需要建立快速、灵敏的筛选方法,如ELISA试剂盒和生物芯片技术等。

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